水质叶绿素a的测定方法

叶绿素是植物光合作用中的重要光合色素，通过测定浮游植物叶绿素，可掌握水体的初级生产力情况。浮游藻类里常见的叶绿素有a、b、c、d四种类型，其中，叶绿素a在一切浮游藻类里大约占有机物干质量的1%~2%，是环境监测中表征浮游植物生物量最常用的指标之一，所以常被用于研究地表水环境的富营养化。同时，叶绿素a也被用来评价水体富营养化水平，以及衡量水体水质。下面我们来看一下水质叶绿素a的测定方法有哪些。

1、分光光度法

分光光度法属于光度法的一种，该分析方法采用的原理是物质分子对光具有选择吸收的特性。叶绿素a的最大吸收峰位于663nm，在一定浓度范围内，其吸光度与浓度符合朗伯-比尔定律，可根据吸光度-浓度之间的线性关系，计算叶绿素a的浓度。

2、荧光光谱法

叶绿素分子被紫外光照射后可发射出特征红色荧光，其荧光强度与叶绿素浓度呈正比，据此可釆用荧光法进行叶绿素a的定量分析。普通萃取荧光法的操作步骤主要为标准溶液的配制、标准曲线的制定和样品荧光强度的测定。将提取的新鲜绿色植物液中的叶绿素作为储备液，用分光光度法标定其浓度：将标准储备液稀释配制成标准系列，用荧光光度计测定标准系列的荧光强度，绘制叶绿素a标准曲线；由样品测得的荧光强度从叶绿素a标准曲线上查得相应浓度。

3、色谱法

高效液相色谱(HPLC)法是一种广泛应用于化学、医药、生命科学等领域的分析手段。使用高效液相色谱法测定叶绿素a时，需要破坏测定藻类的原样，前处理方法与分光光度法的前处理方法相似。

4、遥感监测

水质遥感监测是通过监测一定波长范围内的水体辐射值，定量分析水体反射光谱特征与水质指标间的关系，进而构建水质指标反演算法的一类方法体系。遥感技术测定叶绿素a近年来已经被国内外许多学者证实具有监测范围广、速度快、成本低和便于进行长期动态监测的优势。

5、pH值法

pH值法是研究水域生态系统初级生产量的又一种方法。该方法测定原理主要是依据初级生产量与溶于水中的二氧化碳有定的关系，即水体中的pH值是随着光合作用中吸收二氧化碳和呼吸过程中释放二氧化碳而发生变化的。使用pH电极连续记录水体的pH值变化，由此分析光合量和呼吸量，从而来估计初级生产力。

叶绿素a的测定方法有分光光度法、荧光光谱法、色谱法和遥感监测等方法，其中，分光光度法和荧光光谱法应用最为广泛。其实对于水质叶绿素a监测方法的选取，应根据实际情况进行选择，综合考虑多种因素，如研究目的、对样品前处理精度要求、样品种类的要求、仪器灵敏度要求、仪器成本等。